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Elisa是一種快速、靈敏、準確可靠的定性定量分析方法。樣本的處理對于Elisa實驗的成功起著關鍵的作用。組織樣本一般制成組織勻漿,處理方法如下:(1)使用干凈的工具解剖目標組織,盡快置于冰上,以防被蛋白酶降解。(暫時不處理的組織,置于圓底微量離心管中,浸入液氮中“速凍”,在-80℃下存儲樣品備用)。(2)用預冷的PBS緩沖液(0.01M,pH=7.4)洗滌組織去除殘留的血液,稱重后備用。若組織塊較大,需先剪碎。(3)在冰上用研磨緩沖液(常用PBS緩沖液,但最好使用50mMT...
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細胞培養(yǎng)到底選用培養(yǎng)瓶?培養(yǎng)皿?還是培養(yǎng)板?這個問題的答案是:根據實驗目的和需要來進行選擇!來讓我們一起看看培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板的選擇吧!一、培養(yǎng)瓶如果實驗目的是培養(yǎng)原代細胞和常規(guī)的傳代細胞,一般選擇用培養(yǎng)瓶,可獲得大量實驗用細胞。培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的,例如T25、T75、T175,數字就是表面積,T25就是25cm2,T75就是75cm2,T1755就是175cm2。常見的細胞培養(yǎng)瓶分為一次性的塑料瓶和玻璃瓶,他們各有特色。玻璃瓶的優(yōu)點是:成本低、透光性強、可重復使...
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原代細胞保留了體內組織的特性和功能,因此,原代細胞常被用于細胞實驗等,讓我們一起來看看原代細胞培養(yǎng)的應用和優(yōu)缺點。一、原代細胞培養(yǎng)的應用(1)藥理學和藥效學研究原代細胞培養(yǎng)可用于評估藥物對特定細胞類型的作用和效果,更接近體內情況,有助于篩選和優(yōu)化藥物。(2)癌癥研究原代腫瘤細胞培養(yǎng)可以提供更準確的癌癥模型,用于研究腫瘤的生長、轉移和治療反應。(3)組織工程研究原代細胞可用于構建組織工程支架或模擬器官的種子細胞,用于再生醫(yī)學和器官修復研究。二、原代細胞的優(yōu)點(1)保留了原代細胞...
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培養(yǎng)基的目的是給細胞提供營養(yǎng),促進細胞增殖。細胞培養(yǎng)基內含平衡鹽溶液,還含有少量的碳水化合物、氨基酸、脂類、無機鹽、維生素、微量無素和細胞生長因子等。根據其成分、用途和性質,常見培養(yǎng)基的分類如下:常見培養(yǎng)基的分類一:合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基的成分明確,營養(yǎng)全面,適用于各種細胞類型的培養(yǎng)。常見的合成培養(yǎng)基有MEM、DMEM、RPMI1640等。常見培養(yǎng)基的分類二:天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基以動物血清或血漿為基質,添加一定量的營養(yǎng)成分,適用于某些特定細胞類型的培養(yǎng)。如添加了動物血清的DME...
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細胞克隆形成實驗是用來檢測細胞增殖能力、侵襲性、對殺傷因素敏感性等項目的重要技術方法。一、實驗原理接種細胞后,只有同時具有貼壁和增殖活力的細胞才會形成克隆??寺⌒纬陕史从臣毎莫毩⑸婺芰Φ膹娙?,用于評價細胞群體依賴性和增殖能力。克隆形成率與接種密度有一定關系,在進行測定時需要將接種的單個細胞分散為懸液,并直接接種在培養(yǎng)皿中進行持續(xù)一周以上的培養(yǎng),并在此期間進行檢查。當出現新的、由單個原始生長出來的完整幾何結構時,則可以停止培養(yǎng)過程。克隆形成依據采用的培養(yǎng)介質的不同,分為平板...
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